Skip to content

Autoprzeciwciała przeciwko GABA-ergicznym neuronom i trzustkowym komórkom beta w zespole Stiff-Mana

1 miesiąc ago

527 words

Zespół STIFF-MAN to rzadka, ciężka choroba ośrodkowego układu nerwowego, charakteryzująca się postępującą sztywnością i bolesnymi skurczami mięśni ciała.1 2 3 4 Jego przyczyna jest nieznana. Objawy są łagodzone przez leki, które zwiększają przekaźnictwo nerwowe, w których pośredniczy kwas gamma-aminomasłowy (GABA), 5 6 7, chociaż leki te nie wpływają na przebieg choroby. Obecna hipoteza głosi, że zespół sztywno-męski może wynikać z braku równowagi pomiędzy szlakami katecholaminergicznymi a ścieżkami GABA-ergicznymi kontrolującymi aktywność motoryczną jednostki, prawdopodobnie dlatego, że szlaki GABA-ergiczne są upośledzone.8 9 10 Ostatnio opisaliśmy pacjenta ze sztywnym człowiekiem zespół, epilepsja i cukrzyca insulinozależna (IDDM), u których różne kliniczne i laboratoryjne wyniki sugerują, że objawy neurologiczne były pochodzenia autoimmunologicznego (Pacjent 1, Tabela 1) .13 Autoprzeciwciała przeciwko neuronom GABA-ergicznym (głównie ich nerwy terminale) były obecne w surowicy pacjenta i płynie mózgowo-rdzeniowym. Decarboksylaza kwasu glutaminowego (GAD), enzym, który katalizuje konwersję glutaminianu do GABA, był głównym autoantygenem. GAD jest skoncentrowany w terminalach nerwowych GABA-ergicznych i poza układem nerwowym w trzustkowych komórkach beta. W związku z tym surowica pacjenta i płyn mózgowo-rdzeniowy również reagowały z trzustkowymi komórkami beta.13 Aby zbadać możliwe ogólne znaczenie tych obserwacji, szukaliśmy podobnych autoprzeciwciał w surowicy i płynie mózgowo-rdzeniowym stosunkowo dużej liczby pacjentów z zespołem sztywnego mężczyzny.
Metody
Populacja pacjentów
Próbki surowicy od 32 pacjentów (11 mężczyzn i 21 kobiet), którym postawiono diagnozę zespołu sztywno-męskiego według kryteriów Gordona i współpracowników2, zebrano i przechowywano w temperaturze -20 ° C do czasu użycia. Pochodzili z następujących krajów: Australia (2), Włochy (3), Południowa Afryka (2), Trynidad i Tobago (1), Wielka Brytania (5), Stany Zjednoczone (16) i Republika Federalna Niemiec (3) . Próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, otrzymane po uzyskaniu świadomej zgody, były dostępne od 24 pacjentów. Kontrolne próbki surowicy otrzymano od 218 osób. Obejmowały one osoby zdrowe (16) i pacjentów z różnymi zaburzeniami neurologicznymi (111), IDDM (74) i inne specyficzne dla narządów (20) lub układowe (3) choroby autoimmunologiczne. Niektórzy pacjenci mieli dwie lub więcej chorób.
Próbki tkanek
Małe fragmenty kory mózgowej uzyskano z chirurgicznie usuniętych ognisk padaczkowych lub z marginesów wycięcia guzów mózgu. Próbki natychmiast utrwalono w 4% formaldehydzie do analizy immunocytochemicznej lub zamrożono w -70 ° C aż do użycia w badaniach biochemicznych.
Test immunocytochemiczny do wykrywania autoprzeciwciał przeciwko neuronom GABA-ergicznym
Próbki surowicy i płynu mózgowo-rdzeniowego od pacjentów z zespołem sztywnego mężczyzny i kontrole zostały użyte jako źródło pierwotnych przeciwciał do wybarwiania fragmentów szczurzej i ludzkiej tkanki mózgowej w poprzednio opisanym teście immunocytochemicznym.13, 15 Próbek surowicy i płynu mózgowo-rdzeniowego użyto w rozcieńczeniach 1:20 i 1: 2, odpowiednio. Niektóre sekcje wybarwiono kontrastowo hematoksyliną.
Inne autoprzeciwciała swoiste dla organów
Przeciwciała komórek wysp trzustkowych, przeciwciała komórek żołądka, przeciwciała tyreoglobuliny i przeciwciała z frakcją mikrosomów tarczycy wykryto za pomocą standardowych procedur laboratoryjnych.16, 17
Metody biochemiczne i immunochemiczne
Immunoblot
Całkowite homogenaty szczurzej i ludzkich tkanek mózgu przygotowano w pożywce zawierającej 10 mM bufor fosforanu potasu, mM EDTA i mieszaninę inhibitorów proteazy (1 .g aprotyniny na mililitr, .g leupeptyny na mililitr, .g pepstatyny na mililitr, .g antypary na mililitr i 50 .g fenylo-metylosulfonylo-fluorku na mililitr)
[przypisy: braveran skład, bagmasz, barizola dzierżoniów ]

0 thoughts on “Autoprzeciwciała przeciwko GABA-ergicznym neuronom i trzustkowym komórkom beta w zespole Stiff-Mana”